妊娠期妇女，由于体内促凝因子水平增高，抗凝物浓度降低等，血液处于高凝状态。这属于正常生理过程，有利于产后机体恢复^［1］。既往报道，随着孕周增加，D-二聚体浓度会逐渐升高，其他凝血指标如凝血酶原时间、活化部分凝血酶原时间及凝血酶时间等变化不明显。另一方面，D-二聚体（D-Dimer，DD）作为交联纤维蛋白的降解产物，是反映体内血栓形成和高凝状态的有效指标。孕期出现多种并发症和合并症时，如妊娠高血压综合征、早产等情况时，D-二聚体浓度也会升高，是评价凝血异常的重要辅助手段。因此，如何区分不同孕周期正常生理状态与疾病状态的D-二聚体浓度水平，是临床迫切希望解决的问题。既往我国个别地区曾报道不同孕周D-二聚体参考范围，但是不同地区、人群参考范围可能存在差异。而陕西地区尚缺乏相关研究。我院作为西安地区三级甲等妇女儿童专科医院，有必要建立适用于西安地区的孕妇D-二聚体生物参考区间。

1. 分组：2020年12月至2022年3月，招募西北妇女儿童医院常规产检的1 236例孕妇为研究对象，通过填写调查问卷的方式获取相关临床信息。纳入标准包括：按照CLSI EP28-A3c^［2］关于参考区间的定义、建立及验证指南要求，纳入各期妇女至少 120例，年龄>18岁且依从性较好，单胎。排除标准包括：有不良孕产史（包括曾经有过自然流产、免疫性流产、稽留流产、胎停、死胎、胎儿畸形、胎儿发育不良）、正在服用可能影响纤溶系统或者凝血功能的药物、有凝血方面病史或家族史、患有慢性疾病（包括肾病、心血管疾病）、感染类疾病（包括乙肝、丙肝、艾滋、梅毒）或妊娠期合并症（包括妊娠期糖尿病、妊高症）。根据文献［3］，将1 236例健康孕妇孕周分成5组，分别是：≤13周，253例；13⁺¹~20周，243例；20⁺¹~27周，241例；27⁺¹~35周，249例；≥35⁺¹周，250例。根据年龄将上述5组再分为两组，分别是<30岁组和≥30岁组，<30岁组中，孕期≤13周、13⁺¹~20周、20⁺¹~27周、27⁺¹~35周、≥35⁺¹周分别为124例、121例、120例、123例、124例；≥30岁组中，孕期≤13周、13⁺¹~20周、20⁺¹~27周、27⁺¹~35周、≥35⁺¹周分别为129例、122例、121例、126例、126例。

2. 健康对照组：选取同期的266名妇保科体检的健康非孕育龄妇女为对照组，根据年龄将其分为两组，分别是：<30岁组，121例；≥30岁组，145例。

本次所有研究对象均以门诊ID区分登记，相互独立。本研究经西北妇女儿童医院伦理委员会审查同意（2021017），所有研究对象均对本次研究知情，且签署知情同意书。

空腹采集静脉血1.8 ml于含0.109 mol/L枸橼酸钠抗凝管内，2 360×g离心10 min获得乏血小板血浆，并且在2 h内完成检测，标本无黄疸、溶血及乳糜血。采用STA-R Evolution全自动血凝仪（法国Diagnostica Stago公司）及配套试剂进行检测。室内质控、室间质评均合格。

采用Graph Prism9.0软件分析数据，先对D-二聚体值进行正态性检验，使用Kolmogorov-Smirnov检验方法，结果呈偏态分布，用中位数和百分位数［M（Q₁，Q₃）］表示。相同孕期组30岁以上和30岁以下的两组间比较，采用Mann-Whitney U检验，以P<0.05表示差异有统计学意义；相同年龄段的不同孕期及健康非孕对照组的多组间比较采用Kruskal-Wallis H检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。临床结果以偏高为异常，使用第95百分位数值（P₉₅），计算单侧参考区间。

随着孕周的增加，孕妇的血浆D-二聚体水平明显升高，二者呈正相关。不同孕周的D-二聚体水平比较有统计学差异（P<0.05），但是孕周相同年龄段不同孕妇的D-二聚体水平比较无差异（P>0.05），见表1。

本次研究结果显示，孕周≤13周、13⁺¹~20周、20⁺¹~27周、27⁺¹~35周、≥35⁺¹周孕妇的血浆D-二聚体单侧参考区间分别为≤0.89、≤1.53、≤2.44、≤2.74、≤3.82 μg/ml，见表2。

各孕期分别另外收集20份独立样本进行检测，均在本研究建立的参考区间内，说明本研究5个阶段孕期的血浆D-二聚体的参考区间适用于西安地区的妊娠期妇女，见表3。

妊娠作为女性特殊的一个生理过程^{［4, 5］}，具备了形成静脉血栓的三大危险因素，分别是血管受损、血流缓慢以及高凝状态，相关统计数据显示，孕妇的静脉血栓发生率为0.77%~1.75%，明显高于非孕妇，并且产褥期的发生率是妊娠期的20~80倍，尤其是分娩后第1周，甚至达到100倍，所以监测D-二聚体水平对于评价妊娠妇女血栓风险尤为重要^［6］。

国内外研究表明，与非孕期女性相比，孕期女性的D-二聚体水平明显升高。比如李帅等^［3］在文献报道中发现，在孕38~40周、28~36周、19~21周以及小于12周时，血浆D-二聚体水平正常的孕妇所占比例分别为0%、6%、32%、81%。而Suzukik等^［7］在研究中指出，在孕早期和孕28周时，D-二聚体水平超过正常阈值的孕妇则分别占25%、95%。本次研究发现，与非孕期健康育龄妇女相比，孕期女性的D-二聚体水平明显较高，并且与孕周呈正比关系，这一结果与上述研究报道基本一致。Murphy等^［8］发现，孕早、中、晚期孕妇的D-二聚体水平高于这一界定值的比例分别为51%、78%、100%。目前临床普遍采用的D-二聚体参考范围为健康成人的平均水平。本研究中，试剂盒推荐的D-二聚体诊断界定值为0.5 μg/ml，采用本中心数据统计发现，孕中、晚期健康孕妇的D-二聚体水平高于这一界定值的比例较高，分别为69.38%、100%。因此，只有按照不同孕周分别建立D-二聚体的参考范围，才能辅助临床识别妊娠妇女是否发生静脉血栓，有助于正确判断患者病情严重程度。

关于不同孕周的D-二聚体参考范围，国内外已有多个研究报道。一项丹麦的研究建议^［9］，健康孕妇孕早、中、晚期的D-二聚体水平范围分别为0.167~1.205 mg/L、0.396~3.259 mg/L、0.552~3.345 mg/L。广州地区学者建立的孕晚期血浆D-二聚体参考区间≤3.43 mg/L^［10］。浙江地区建立的健康孕妇血浆 D-二聚体参考区间为孕周≤13周、14~20周、21~27周、28~34周、≥35周孕妇的血浆D-二聚体参考区间分别为≤0.64、≤1.54、≤2.60、≤3.01、≤3.19 mg/L^［3］。本研究构建的西安地区健康孕妇血浆D-二聚体参考区间为孕周≤13周、13⁺¹~20周、20⁺¹~27周、27⁺¹~35周、≥35⁺¹周孕妇的血浆D-二聚体单侧参考区间分别为≤0.89、≤1.53、≤2.44、≤2.74、≤3.82 μg/ml，这一结果与广州地区和浙江地区的研究结果基本一致，但是与其他研究结论有所差异，可能与不同检测方法、分组、民族、区域以及人种等有关^{［11, 12］}。如广州地区采用Sysmex CA 7000全自动血凝分析仪（免疫比浊法），而湖南地区采用全自动生化分析仪（免疫比浊法）。本研究和浙江地区采用的都是法国STA-R Evolution全自动血凝仪及配套试剂（免疫比浊法）。这也说明不同地区不同医疗机构有必要建立自己的参考范围，并在报告中注明采用的检测方法。在纳入人群上，本研究在妇女儿童专科医院开展，和综合医院检验科的人群不同；而且各孕周纳入人数均超过120例，结果更具有代表性。另外，本研究采用问卷调查的方式进行人群的筛选，更严格的排除了不良孕史、妊娠并发症和伴有其他系统疾病对此研究造成的选择偏倚。

综上所述，本次研究初步建立了西安地区健康孕妇血浆D-二聚体参考区间，并且验证通过，可为西安地区临床监测孕妇凝血功能提供正常范围参考。